高壓制備液相色譜系統(tǒng)是一種廣泛應(yīng)用于化學(xué)、生物、醫(yī)藥等領(lǐng)域的分析分離技術(shù)。它通過將待分析樣品在高壓下通過填充有固定相的色譜柱,利用不同組分在固定相和流動(dòng)相中的吸附、分配、離子交換等作用的差異,實(shí)現(xiàn)對(duì)復(fù)雜樣品中各組分的分離和定量分析。具有分離效果好、靈敏度高、操作簡(jiǎn)便等優(yōu)點(diǎn),已成為現(xiàn)代分析實(shí)驗(yàn)室的重要工具。
1.高壓泵:高壓泵是核心部件,負(fù)責(zé)將流動(dòng)相以高壓形式輸送到色譜柱。高壓泵的性能直接影響到整個(gè)系統(tǒng)的分離效果和穩(wěn)定性。常見的高壓泵有恒流泵、梯度泵等。
2.色譜柱:色譜柱是實(shí)現(xiàn)樣品分離的關(guān)鍵部件,其內(nèi)部填充有固定相。固定相可以是硅膠、聚合物、離子交換樹脂等。根據(jù)固定相的性質(zhì)和作用力,色譜柱可以分為正相色譜柱、反相色譜柱、離子交換色譜柱等。
3.檢測(cè)器:檢測(cè)器用于檢測(cè)經(jīng)過色譜柱分離后的樣品組分,并將其轉(zhuǎn)化為電信號(hào)。常見的檢測(cè)器有紫外檢測(cè)器、熒光檢測(cè)器、示差折光檢測(cè)器等。
4.餾分收集器:餾分收集器用于收集經(jīng)過色譜柱分離后的各組分。根據(jù)需要,可以選擇手動(dòng)或自動(dòng)餾分收集器。
5.控制系統(tǒng):控制系統(tǒng)負(fù)責(zé)整個(gè)自動(dòng)化操作,包括泵的流速控制、檢測(cè)器的數(shù)據(jù)采集、餾分收集器的自動(dòng)控制等。
工作原理:
1.高壓驅(qū)動(dòng):高壓泵將流動(dòng)相以高壓形式輸送到色譜柱,使樣品在高壓下通過色譜柱。高壓的作用可以使樣品中各組分的有效擴(kuò)散距離增大,從而提高分離效果。
2.樣品分離:樣品在高壓作用下通過色譜柱,由于不同組分在固定相和流動(dòng)相中的吸附、分配、離子交換等作用的差異,實(shí)現(xiàn)對(duì)復(fù)雜樣品中各組分的分離。
3.檢測(cè)與定量:經(jīng)過色譜柱分離后的樣品組分被檢測(cè)器檢測(cè),并將其轉(zhuǎn)化為電信號(hào)。通過對(duì)電信號(hào)的處理和分析,可以實(shí)現(xiàn)對(duì)樣品中各組分的定量分析。
4.餾分收集:根據(jù)檢測(cè)器的信號(hào),控制系統(tǒng)可以自動(dòng)控制餾分收集器的工作,實(shí)現(xiàn)對(duì)分離后各組分的自動(dòng)收集。
高壓制備液相色譜系統(tǒng)的應(yīng)用:
1.藥物分析:可以用于藥物原料藥、中間體、成品藥的含量測(cè)定、雜質(zhì)檢查等。此外,還可以用于手性藥物的拆分和合成。
2.環(huán)境監(jiān)測(cè):可以用于水質(zhì)、大氣、土壤等環(huán)境樣品中有機(jī)污染物、重金屬離子等的分析測(cè)定。
3.食品檢測(cè):可以用于食品中的農(nóng)藥殘留、添加劑、色素等有害物質(zhì)的檢測(cè)。
4.石油化工:可以用于石油產(chǎn)品、化工產(chǎn)品中微量成分的分析測(cè)定,如潤(rùn)滑油中的抗磨劑、燃料油中的抗氧化劑等。
5.生物制品:可以用于生物制品中蛋白質(zhì)、多肽、核酸等生物大分子的分析和純化。