制備液相色譜的使用步驟

　　一、開(kāi)機(jī)

　　1、接通電腦和儀器電源(接通電源之前可先把吸頭拿到要使用的流動(dòng)相瓶中)；

　　2、開(kāi)儀器電源開(kāi)關(guān)，一般先上后下，下為檢測(cè)器開(kāi)關(guān)；

　　3、檢查流動(dòng)相是否夠，儀器上記錄的溶劑量時(shí)候正確；

　　4、開(kāi)電腦；

　　5、打開(kāi)儀器聯(lián)機(jī)軟件進(jìn)入界面，點(diǎn)擊啟動(dòng)設(shè)置泵流速為10，此時(shí)儀器中應(yīng)該有液體流出；

　　6、點(diǎn)擊平衡然后點(diǎn)擊每個(gè)波長(zhǎng)和調(diào)整；

　　沖一段時(shí)間，待壓力穩(wěn)定后可以進(jìn)樣。

　　二、進(jìn)樣

　　1、將進(jìn)樣器扭到load朝上，吸取一定量待分離液，快速注入，做過(guò)的是吸取0.2毫升；

　　2、點(diǎn)擊控制界面菜單欄中“運(yùn)行控制”按鈕—樣品信息—設(shè)置信息存儲(chǔ)路徑(每次都要做)；

　　3、扭動(dòng)進(jìn)樣器，使處于inload狀態(tài)，保留時(shí)間開(kāi)始計(jì)時(shí)；

　　4、接峰；

　　5、所有峰出來(lái)后，點(diǎn)擊菜單欄中的中斷—中斷，準(zhǔn)備重復(fù)進(jìn)樣。

　　三、關(guān)機(jī)

　　1、點(diǎn)擊中斷后沖幾分鐘，將流速設(shè)為0，待壓力為0后將吸頭轉(zhuǎn)移到甲醇中，并把流速設(shè)為10；

　　2、沖到已經(jīng)沒(méi)有東西被沖下為止，一般需要半個(gè)小時(shí)。一般此時(shí)壓力早已穩(wěn)定；

　　3、將流速設(shè)為0，點(diǎn)擊界面上的關(guān)閉(在啟動(dòng)旁邊)；

　　4、關(guān)閉窗口，彈出的窗口都點(diǎn)肯定的，如確定是等。

　　制備液相色譜中，有三個(gè)可以觀察到的狀態(tài)：柱壓、檢測(cè)器基線、譜圖。通過(guò)觀察和記錄這三個(gè)狀態(tài)可以監(jiān)測(cè)儀器是否正常。若某個(gè)狀態(tài)出現(xiàn)異常，故障排查和解決方案如下。

　　1、柱壓波動(dòng)

　　1）吸液管路進(jìn)氣泡

　　①溶劑不足，吸濾頭吸入空氣，添加溶劑并排氣泡。

　　②吸濾頭臟了或堵塞，用異丙醇（或5%稀硝酸）清洗。

　　③溶劑中有氣泡（尤其兩種以上溶劑混合），超聲（或抽濾）脫氣。

　　2）泵流量不穩(wěn)

　?、賳蜗蜷y堵塞，大流速，若不能解決，則需拆下單向閥（異丙醇）超聲清洗清洗或更換單向閥。

　?、谥芊馊δp，更換密封圈。

　?、郾妙^污染，柱塞桿往復(fù)活動(dòng)受阻，清洗泵頭。

　　3）柱床塌陷，維修或更換色譜柱。

　　4）流動(dòng)相混合后吸放熱導(dǎo)致溫度變化，以致柱壓波動(dòng)，如乙腈和水混合吸熱，甲醇和水混合放熱。若影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果，則增加柱溫箱或流動(dòng)相預(yù)混。

　　2、柱壓升高或超壓。