制備液相色譜儀是一種常用的色譜儀產品,主要由儲液器、進樣器、色譜柱、檢測器、記錄儀等幾部分組成,被廣泛用于多個領域中。液相色譜法只要求樣品能制成溶液,不受樣品揮發(fā)性的限制,流動相可選擇的范圍寬,固定相的種類繁多,因而可以分離熱不穩(wěn)定和非揮發(fā)性的、離解的和非離解的以及各種分子量范圍的物質。
反相色譜的流動相通常以水為基礎,然后加入一定量的水溶極性調節(jié)劑,如甲醇,乙腈,四氫呋喃等,極性調節(jié)劑的性質和比例對溶質的保留和分離選擇性有顯著影響。一般來說,甲醇-水體系可以滿足大多數(shù)樣品的分離要求,流動相因其粘度低、價格低廉而成為反相色譜常用的流動相。
液相色譜儀的記錄樣品通過檢測器吸光度變化引起的電信號變化,從而產生色譜圖,結果取決于后期色譜數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)的數(shù)據(jù)處理。以下是兩種常用的液相色譜儀數(shù)據(jù)處理方法。
光譜處理后可以制作校正曲線。校正曲線是數(shù)據(jù)處理的難點。它是一個標準,使信息和數(shù)據(jù)的標準光譜圖處理樣品光譜圖。液相色譜儀的校正是通過分析制備的標準樣品來確定計算組分濃度的響應系數(shù)的過程。
內部標準方法是將標準的標準物質作為要求的內部條件,并以合適的操作條件對樣品進行嚴格的試驗和試驗結果的檢驗,但對樣品的準確操作條件和試驗結果的分析要是嚴格的,而對樣品的內部標準則不需要對樣品進行嚴格的校正。